磁気ビーズ細胞分離システム
特定の細胞集団を特性解析等のアプリケーションに使用する場合、末梢血単核細胞（PBMC：Peripheral Blood Mononuclear Cells）や全血等の不均一な細胞集団から目的細胞を分離する必要があります。 プロテインテックは、高い特異性と親和性を示す抗体（またはストレプトアビジン）を超常磁性ポリスチレン粒子（磁気ビーズ）に共有結合させた磁気ビーズ細胞分離システムを開発しました。
すべての製品は、自社で開発、製造および検証されており、迅速かつ簡便な細胞分離を実現します。
細胞懸濁液を「細胞分離磁気ビーズ」とインキュベーションするだけで、細胞除去および細胞分離が可能です。カラムフリー（カラムを使用しない方法）で、迅速かつ簡便に、純度が高い、均一な細胞集団を得ることができます。
プロテインテックで品質検証済みの抗体を使用
高いロット間一貫性
末梢血単核細胞（PBMC）や全血を使用して検証を実施
FACS（蛍光活性化セルソーティング）装置を用いる細胞分離システムよりも、ユーザーフレンドリーで迅速かつ簡便な細胞分離システム
複数のマグネットで検証済み（手持ちのマグネットを使用可能）
細胞分離キットは、目的とする特定の細胞を分離することができ、分離した細胞はさらなる研究や解析に使用されます。プロテインテックの細胞分離システムでは、高親和性の抗体が結合した磁気ビーズによる細胞分離方法を採用しています。細胞分離に用いられる2種類の手法である「ポジティブセレクション」または「ネガティブセレクション」を使用して、細胞集団から特定の細胞種を選択的に分離または除去します。
ポジティブセレクション
プロテインテックのポジティブセレクション用磁気ビーズおよびキットは、抗体と磁気ビーズを用いて目的とする細胞を標識し、細胞集団から分離します。分離時に目的細胞はマグネットに固着させて、不要な細胞は除去されます。分離細胞が高度に精製されているという点が、ポジティブセレクションの長所です。
ネガティブセレクション
プロテインテックのネガティブセレクション用キットは、抗体と磁気ビーズを用いて目的ではない細胞を標識し、それら不要な細胞集団を除去します。分離時に不要な細胞はマグネットに固着させて、目的細胞は細胞除去画分（depleted fraction）に残存するようにします。目的細胞に抗体が結合していないため、その後のアプリケーションの実施や解析が容易であるという点が、ネガティブセレクションの長所です。
ヒトCD4抗体結合磁気ビーズ（製品名：Human CD4 Magnetic Beads、カタログ番号：MS003）を使用したCD4+（陽性）T細胞の濃縮: 正常ドナーPBMCから磁気ビーズで選択することにより分離したCD4+（陽性）T細胞を細胞分裂のトラッキングのためにCellTrace Violet（Thermofisher社）で標識し、プレートに結合させたCD3抗体（1µg/mL、 カタログ番号：65133-1-Ig）およびCD28抗体（2µg/mL、 カタログ番号：65099-1-Ig）を用いてin vitroで72時間の刺激処理を行った。
Q：磁気ビーズによって分離した細胞をフローサイトメトリー解析に供することは可能ですか？
A：磁気ビーズに「未結合」の細胞画分はフローサイトメトリーに使用できますが、磁気ビーズに結合した細胞画分は使用できません。 なおin vitroでの細胞培養とその後アッセイでは、磁気ビーズに未結合の細胞と磁気ビーズに結合した細胞のいずれも使用することができます。
Q：磁気ビーズは細胞内に取り込まれますか？
A：いいえ、磁気ビーズは細胞内に取り込まれません。
Q：磁気ビーズ未結合画分を回収するためのネガティブセレクション用の細胞分離キットはありますか？
A：「細胞分離キット」をご検討ください。分離後の細胞をフローサイトメトリー等のアプリケーションで使用できるようにネガティブセレクションを採用しています。
Q：どのようなマグネットが使用できますか？
A：本製品群は、様々なマグネットで検証されています。現在お客様のラボで使用しているものを使用することができます。
Q：細胞分離用のマグネットを販売していますか？
A：販売していません。今後の開発と販売を検討しています。
Q：磁気ビーズの大きさはどのくらいですか？
A：直径約2.7µmです。
Q：全血から細胞を分離できますか？
A：はい、全血を用いた検証を実施しています。
Q：FACSやカラムベースの細胞分離法に対して利点はありますか？
A：磁気ビーズおよび磁気ビーズキットのプロトコールは、FACSやカラムベースの細胞分離法と比較して迅速かつ簡便です。 洗浄操作が少なく、より穏やかな条件のプロトコールで細胞を分離することができます。
Q：製品の有効期限はどのくらいですか？
A：4℃で12カ月間です。
Q：磁気ビーズが結合した細胞から磁気ビーズを取り除くことはできますか？
A：現在、磁気ビーズと細胞の複合体から磁気ビーズを取り除くことができる製品はありません。今後の開発を検討しています。
Q：推奨される細胞懸濁用の分離バッファーには何がありますか？
A：プロトコール記載のバッファー組成（PBS、0.1% BSA、2mM EDTAp、H7.4）を推奨します。
高い効率で細胞除去
CD8+（陽性）細胞を除去後、細胞懸濁液の上清をPB450-CD3抗体（クローン番号：HIT3a）およびCL647-CD8抗体（クローン番号：OKT8）で染色した。 解析時にCD45陽性細胞をゲートした。 左：選別前のCD3+CD8+細胞。 右：細胞除去後のCD3+CD8+細胞。 ヒトCD8抗体結合磁気ビーズ（製品名：Human CD8 Magnetic Beads、カタログ番号：MS004）は、異なる3検体のドナー由来のPBMCを使用して検証が実施されています。
細胞分離製品
| 製品名 | 包装サイズ | ||
|---|---|---|---|
| Streptavidin Magnetic Beads | 0.1mL or 1mL | ||
| Human CD3 Magnetic Beads | 10 or 100 tests | ||
| Human CD4 Magnetic Beads | 10 or 100 tests | ||
| Human CD8 Magnetic Beads | 10 or 100 tests | ||
| Human CD11b Magnetic Beads | 10 or 100 tests | ||
| Human CD14 Magnetic Beads | 10 or 100 tests | ||
| Human CD16 Magnetic Beads | 10 or 100 tests | ||
| Human CD19 Magnetic Beads | 10 or 100 tests |
| 製品名 | 包装サイズ | 構成品 | ||
|---|---|---|---|---|
| Human CD3 Magnetic Beads Kit | 10 or 100 tests | Streptavidin Magnetic Beads, Human CD3 (OKT3) Biotin Antibody | ||
| Human CD4 Magnetic Beads Kit | 10 or 100 tests | Streptavidin Magnetic Beads, Human CD4 (RPAT4) Biotin Antibody | ||
| Human CD8 Magnetic Beads Kit | 10 or 100 tests | Streptavidin Magnetic Beads, Human CD8 (UCHT4) Biotin Antibody | ||
| Human CD11b Magnetic Beads Kit | 10 or 100 tests | Streptavidin Magnetic Beads, Biotin Labeled Human CD11b (ICRF44) Antibody | ||
| Human CD14 Magnetic Beads Kit | 10 or 100 tests | Streptavidin Magnetic Beads, Biotin Labeled Human CD14 (26IC) Antibody | ||
| Human CD16 Magnetic Beads Kit | 10 or 100 tests | Streptavidin Magnetic Beads, Biotin Labeled Human CD16 (3G8) Antibody | ||
| Human CD19 Magnetic Beads Kit | 10 or 100 tests | Streptavidin Magnetic Beads, Biotin Labeled Human CD19 (4G7) Antibody |
| 製品名 | 包装サイズ | 構成品 | ||
|---|---|---|---|---|
| Mouse Lineage Depletion Kit | 10 or 100 tests | Streptavidin Magnetic Beads, Biotin Labeled Mouse Lineage Antibody Cocktail | ||
| Human CD4 Isolation Kit | 10 or 100 tests | Streptavidin Magnetic Beads, Biotin Labeled Human CD4 Isolation Antibody Cocktail | ||
| Human CD8 Isolation Kit | 10 or 100 tests | Streptavidin Magnetic Beads, Biotin Labeled Human CD8 Isolation Human CD8 Selection Antibody Cocktail | ||
| Human CD3 Isolation Kit | 10 or 100 tests | Streptavidin Magnetic Beads, Biotin Labeled Human CD3 Isolation Antibody Cocktail | ||
| Human CD4 Memory T Cell Isolation Kit | 10 or 100 tests | Streptavidin Magnetic Beads, Biotin Labeled Human CD4 Memory T Cell Isolation Antibody Cocktail | ||
| Human CD8 Memory T Cell Isolation Kit | 10 or 100 tests | Streptavidin Magnetic Beads, Biotin Labeled Human CD8 Memory T Cell Isolation Antibody Cocktail | ||
| Human NK Cell Isolation Kit | 10 or 100 tests | Streptavidin Magnetic Beads, Biotin Labeled Human NK Cell Isolation Antibody Cocktail |
| 製品名 | 包装サイズ | 構成品 | ||
|---|---|---|---|---|
| Human CD3/CD28 T Cell Activation Beads Kit | 10 or 100 tests | Streptavidin Magnetic Beads, Human CD3 (OKT3) Biotin Antibody, Human CD28 (28.2) Biotin Antibody |