特集 : DNA損傷修復マーカー

修復されていないDNA損傷は、突然変異誘発または細胞死につながります。

修復されていないDNA損傷は、突然変異誘発または細胞死につながります。

DNA変異は、多くの癌種における腫瘍形成の要因として知られています。そうした癌には、結腸癌、皮膚癌、白血病、リンパ腫、乳癌、卵巣癌等が含まれます。


筋細胞またはニューロンにおけるDNA損傷の蓄積は、変性疾患を引き起こす可能性があります(1)。ヒトの脳は、適切な機能を維持するために体の全酸素摂取量の20%を消費することで、十分なエネルギーを生成します。ROS(活性酸素種)は、このエネルギー産生の経路から生じる自然な副産物であるため、脳内で容易に蓄積され、DNA損傷を誘発する可能性があります。

細胞は日常的に広範囲のDNA損傷因子に曝露されます(2)。ゲノム安定性の保護手段として、特に酸化、加水分解、DNA塩基の二量体化、および一本鎖または二本鎖DNA切断による損傷に対して、細胞は多くの修復経路を発達させています(図1)。

図1. DNA損傷特異的修復経路の概要。応答メカニズム:直接修復、MMR(ミスマッチ修復)、BER(塩基除去修復)、NER(ヌクレオチド除去修復)、HR(相同組換え)、MMEJ(マイクロホモロジー媒介末端結合)、およびNHEJ(非相同末端結合)。

気候変動と環境汚染の増加は、DNA損傷因子を拡大しています。したがって、DNA損傷修復メカニズムを理解することは重要です。Tomas Lindahl、Paul Modrich、およびAziz Sancarらは、DNA損傷修復経路の分子基盤を発見した先駆者でした(2015年、ノーベル化学賞)。

図2. CHK1抗体(カタログ番号:60277-1-Ig、希釈倍率:1:50)を使用した、パラフィン包埋ヒト小腸組織スライドの免疫組織化学染色(10倍レンズ下)

図3.  CDC25C抗体(カタログ番号:16485-1-AP、希釈倍率:1:4000、室温で1.5時間インキュベート)によるsh-Controlおよびsh-CDC25Cを遺伝子導入したHeLa細胞のWB解析。

図4.  NBS1抗体(カタログ番号:55025-1-AP、希釈倍率:1:2000、室温で1.5時間インキュベート)によるsh-Controlおよびsh-NBS1を遺伝子導入したHeLa細胞のWB解析。

関連製品

ローディングコントロール抗体

GAPDH Antibody
カタログ番号.: 60004-1-Ig

GAPDHは、ほとんどの種類の細胞で一貫して高発現しているため、ウエスタンブロットでタンパク質のローディングコントロールとして一般的に使用されます。この酵素は、解糖、DNA修復、アポトーシスなどのいくつかの細胞事象に関与します。

ProteintechモノクローナルGAPDH抗体は、ヒト由来の全長タンパク質抗原に対して生成され、2,670を超える製品引用があります。

mouse monoclonal GAPDH antibody WB analysis of HeLa cells
Beta Actin Antibody (KD/KO validated)
カタログ番号: 66009-1-Ig

ベータアクチンは、全ての種類の真核細胞にわたって広く一貫して発現しており、このタンパク質の発現レベルがほとんどの実験処理によって影響を受けないという事実により、通常、ローディングコントロールとして使用されます。

ベータアクチン抗体(カタログ番号:66009-1-Ig)は1,135以上の文献で引用されており、幅広い種に対する反応性を持っています。

WB analysis of Jurkat cells using using beta actin antibody (66009-1-Ig)

Proteintechコントロール抗体は、150ulサイズを¥29,000のお求めやすい価格で提供しています。

 

DNA 損傷修復マーカー

DNA損傷マーカー

タイプ

カタログ番号

損傷タイプ/

修復メカニズム

ATM

ウサギポリクローナル

27156-1-AP

DSB

ATR

ウサギポリクローナル

19787-1-AP

SSB

ATRIP

ウサギポリクローナル

11327-1-AP

SSB

Cdc25A

ウサギポリクローナル

55031-1-AP

SSB, DSB

Cdc25B

ウサギポリクローナル

10644-1-AP

SSB, DSB

Cdc25C

ウサギポリクローナル, マウスモノクローナル

16485-1-AP (Figure 3) ; 66912-1-Ig

SSB, DSB

Chk1

ウサギポリクローナル, マウスモノクローナル

25667-1-AP; 60277-1-Ig (Figure 2)

SSB

Chk2

ウサギポリクローナル

13954-1-AP

DSB

DDB1

ウサギポリクローナル, マウスモノクローナル

11380-1-AP; 66010-1-Ig

SSB/ NER

DDB2

ウサギポリクローナル

10431-1-AP

SSB/ NER

Fen1

ウサギポリクローナル

14768-1-AP

DSB/ MMEJ

H2AX

ウサギポリクローナル

10856-1-AP

DSB

Ku70

ウサギポリクローナル, マウスモノクローナル

10723-1-AP; 66607-1-Ig

DSB/ NHEJ

Ku80

ウサギポリクローナル, マウスモノクローナル

16389-1-AP; 66546-1-Ig

DSB/ NHEJ

Mre11

ウサギポリクローナル

10744-1-AP

DSB/ HR

Nbs1

ウサギポリクローナル

55025-1-AP (Figure 4)

DSB/ HR

PCNA

ウサギポリクローナル, マウスモノクローナル

10205-1-AP; 60097-1-Ig

SSB/ NER

POLD1

ウサギポリクローナル

15646-1-AP

SSB

POLD2

ウサギポリクローナル

10288-1-AP

SSB

POLD3

ウサギポリクローナル

21935-1-AP

SSB

POLD4

ウサギポリクローナル

26209-1-AP

SSB

POLE3

ウサギポリクローナル

15278-1-AP

SSB

POLK

ウサギポリクローナル

14455-1-AP

SSB

Rad1

ウサギポリクローナル

11726-2-AP

SSB

Rad51

ウサギポリクローナル, マウスモノクローナル

14961-1-AP; 67024-1-Ig

DSB/ HR

RFC2

ウサギポリクローナル

10410-1-AP

SSB/ NER

RFC3

ウサギポリクローナル

11814-1-AP

SSB/ NER

RFC4

ウサギポリクローナル

10806-1-AP

SSB/ NER

RFC5

ウサギポリクローナル

10385-1-AP

SSB/ NER

RPA1

ウサギポリクローナル

12448-1-AP

SSB, DSB/ HR

RPA2

ウサギポリクローナル

10412-1-AP

SSB, DSB/ HR

RPA3

ウサギポリクローナル

10692-1-AP

SSB, DSB/ HR

RPA4

ウサギポリクローナル

18144-1-AP

SSB, DSB/ HR

 

表1. DNA損傷マーカーおよびDNA損傷経路に対する利用可能な抗体のリスト

Double Strand Breaks (DSB)

Homologous Recombination (HR)

Microhomology-Mediated End Joining (MMEJ)

Nucleotide Excision Repair (NER)

Non-Homologous End Joining (NHEJ)

Single Strand Breaks (SSB)


参考文献

1. Stein and Toiber (2017) “DNA damage and neurodegeneration: the unusual suspect”.

2. Lindahl and Barnes (2000) “Repair of endogenous DNA damage“.

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Posted:
5 January, 2021

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