Multi-rAb(マルチ・ラブ)
カクテルタイプの組換え二次抗体
『Multi-rAb(マルチ・ラブ)』は、複数クローンのリコンビナント(組換え)抗体を混合したカクテルタイプの二次抗体です。Multi-rAbに含まれる各クローンは、プロテインテックラボにおける厳格なスクリーニング戦略を介して取得され、厳密な特性解析によって選抜されました。各クローンは同一の免疫グロブリン(IgG)上に位置する重複しないエピトープを正確かつ高感度に認識します。実際のアプリケーション検証と最適化によって、カクテル化する複数クローンの組み合わせのパターンが選択/決定され、最高水準のパフォーマンスを発揮する『新タイプの二次抗体』は完成しました。
『Multi-rAb(マルチ・ラブ)』は、複数クローンのリコンビナント(組換え)抗体を混合したカクテルタイプの二次抗体です。Multi-rAbに含まれる各クローンは、プロテインテックラボにおける厳格なスクリーニング戦略を介して取得され、厳密な特性解析によって選抜されました。各クローンは同一の免疫グロブリン(IgG)上に位置する重複しないエピトープを正確かつ高感度に認識します。実際のアプリケーション検証と最適化によって、カクテル化する複数クローンの組み合わせのパターンが選択/決定され、最高水準のパフォーマンスを発揮する『新タイプの二次抗体』は完成しました。
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モノクローナル抗体の「優れた特異性」&ポリクローナル抗体のような「高い検出感度」を発揮します。
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対象動物種以外への交差反応性が最小限のクローンを選抜しています。
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長期的プロジェクトにも最適!安定的な供給能、高いロット間一貫性、再現性を提供します。
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WB、IF、FC、IHC、ELISA等の各種アプリケーションで検証されています。
『Multi-rAb(マルチ・ラブ)』製品ラインアップ
検出ターゲット(動物種) | 包装サイズ | 標識物質(蛍光色素/HRP) |
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Rabbit | 200 uL, 1 mL | CoraLite® Plus 488, CoraLite® Plus 555, CoraLite® Plus 594, CoraLite® Plus 647, CoraLite® Plus 750, HRP, Poly-HRP New |
Mouse | 200 uL, 1 mL | CoraLite® Plus 488, CoraLite® Plus 555, CoraLite® Plus 594, CoraLite® Plus 647, CoraLite® Plus 750, HRP, Poly-HRP New |
様々なライセートのウェスタンブロット(WB)。一次抗体としてBeta Cateninウサギポリクローナル抗体(カタログ番号:51067-2-AP、希釈倍率1:50000)を使用し、二次抗体としてMulti-rAb HRP-Goat Anti-Rabbit Recombinant Secondary Antibody(H+L)(カタログ番号:RGAR001、希釈倍率1:20000)を用いて化学発光検出した。
様々なライセートのウェスタンブロット(WB)。一次抗体としてU2AF2マウスモノクローナル抗体(カタログ番号:68166-1-Ig、希釈倍率1:20000)を使用し、二次抗体としてMulti-rAb HRP-Goat Anti-Mouse Recombinant Secondary Antibody(H+L)(カタログ番号:RGAM001、希釈倍率1:20000)を用いて化学発光検出した。
様々なライセートの蛍光ウェスタンブロット(WB)。一次抗体としてEIF3Eマウスモノクローナル抗体(カタログ番号:67095-1-Ig、アイソタイプ:IgG1)を使用し、二次抗体としてMulti-rAb CoraLite® Plus 750-Goat Anti-Mouse Recombinant Secondary Antibody(H+L)(カタログ番号:RGAM006、希釈倍率1:10000)を用いて蛍光検出した。
様々なライセートの蛍光ウェスタンブロット(WB)。一次抗体としてBeta Tubulinリコンビナントウサギモノクローナル抗体(カタログ番号:80713-1-RR)を使用し、二次抗体としてMulti-rAb CoraLite® Plus 750-Goat Anti-Rabbit Recombinant Secondary Antibody(H+L)(カタログ番号:RGAR006、希釈倍率1:10000)を用いて蛍光検出した。
MCF-7細胞の免疫蛍光染色。緑:ZO-1ウサギポリクローナル抗体(カタログ番号:21773-1-AP)/Multi-rAb CoraLite® Plus 488-Goat Anti-Rabbit Recombinant Secondary Antibody(H+L)(カタログ番号:RGAR002、希釈倍率1:500)。赤:Alpha Tubulinマウスモノクローナル抗体(カタログ番号:66031-1-Ig)/Multi-rAb CoraLite® Plus 594-Goat Anti-Mouse Recombinant Secondary Antibody(H+L)(カタログ番号:RGAM004、希釈倍率1:500)。
MCF-7細胞の免疫蛍光染色。オレンジ:ZO-1ウサギポリクローナル抗体(カタログ番号:21773-1-AP)/Multi-rAb CoraLite® Plus 555-Goat Anti-Rabbit Recombinant Secondary Antibody(H+L)(カタログ番号:RGAR003、希釈倍率1:500)。緑:Alpha Tubulinマウスモノクローナル抗体(カタログ番号:66031-1-Ig)/Multi-rAb CoraLite® Plus 488-Goat Anti-Mouse Recombinant Secondary Antibody(H+L)(カタログ番号:RGAM002、希釈倍率1:500)。
MCF-7細胞の免疫蛍光染色。赤:ZO-1ウサギポリクローナル抗体(カタログ番号:21773-1-AP)/Multi-rAb CoraLite® Plus 594-Goat Anti-Rabbit Recombinant Secondary Antibody(H+L)(カタログ番号:RGAR004、希釈倍率1:500)。緑:Alpha Tubulinマウスモノクローナル抗体(カタログ番号:66031-1-Ig)/Multi-rAb CoraLite® Plus 488-Goat Anti-Mouse Recombinant Secondary Antibody(H+L)(カタログ番号:RGAM002、希釈倍率1:500)。
MCF-7細胞の免疫蛍光染色。緑:ZO-1ウサギポリクローナル抗体(カタログ番号:21773-1-AP)/Multi-rAb CoraLite® Plus 488-Goat Anti-Rabbit Recombinant Secondary Antibody(H+L)(カタログ番号:RGAR002、希釈倍率1:500)。マゼンタ:Alpha Tubulinマウスモノクローナル抗体(カタログ番号:66031-1-Ig)/Multi-rAb CoraLite® Plus 647-Goat Anti-Mouse Recombinant Secondary Antibody(H+L)(カタログ番号:RGAM005、希釈倍率1:500)。
HeLa細胞の免疫蛍光染色。緑:Alpha Tubulinウサギポリクローナル抗体(カタログ番号:11224-1-AP)/Multi-rAb CoraLite® Plus 488-Goat Anti-Rabbit Recombinant Secondary Antibody(H+L)(カタログ番号:RGAR002、希釈倍率1:500)。赤:NPM1マウスモノクローナル抗体(カタログ番号:60096-1-Ig)/Multi-rAb CoraLite® Plus 594-Goat Anti-Mouse Recombinant Secondary Antibody(H+L)(カタログ番号:RGAM004、希釈倍率1:500)。
HeLa細胞の免疫蛍光染色。オレンジ:Alpha Tubulinウサギポリクローナル抗体(カタログ番号:11224-1-AP)/Multi-rAb CoraLite® Plus 555-Goat Anti-Rabbit Recombinant Secondary Antibody(H+L)(カタログ番号:RGAR003、希釈倍率1:500)。緑:NPM1マウスモノクローナル抗体(カタログ番号:60096-1-Ig)/Multi-rAb CoraLite® Plus 488-Goat Anti-Mouse Recombinant Secondary Antibody(H+L)(カタログ番号:RGAM002、希釈倍率1:500)。
HeLa細胞の免疫蛍光染色。赤:Alpha Tubulinウサギポリクローナル抗体(カタログ番号:11224-1-AP)/Multi-rAb CoraLite® Plus 594-Goat Anti-Rabbit Recombinant Secondary Antibody(H+L)(カタログ番号:RGAR004、希釈倍率1:500)。緑:NPM1マウスモノクローナル抗体(カタログ番号:60096-1-Ig)/Multi-rAb CoraLite® Plus 488-Goat Anti-Mouse Recombinant Secondary Antibody(H+L)(カタログ番号:RGAM002、希釈倍率1:500)。
HeLa細胞の免疫蛍光染色。マゼンタ:Alpha Tubulinウサギポリクローナル抗体(カタログ番号:11224-1-AP)/Multi-rAb CoraLite® Plus 647-Goat Anti-Rabbit Recombinant Secondary Antibody(H+L)(カタログ番号:RGAR005、希釈倍率1:500)。緑:NPM1マウスモノクローナル抗体(カタログ番号:60096-1-Ig)/Multi-rAb CoraLite® Plus 488-Goat Anti-Mouse Recombinant Secondary Antibody(H+L)(カタログ番号:RGAM002、希釈倍率1:500)。
マウス結腸組織スライドの免疫組織化学染色(10X)。使用組織:Tris-EDTA buffer(pH 9.0)で熱処理し抗原賦活化したパラフィン包埋マウス結腸組織。一次抗体としてE-cadherinポリクローナル抗体(カタログ番号:20874-1-AP、希釈倍率1:5000)を使用し、二次抗体としてMulti-rAb Polymer HRP-Goat Anti-Rabbit Recombinant Secondary Antibody(H+L)(カタログ番号:RGAR011)を使用した。
ラット脳組織スライドの免疫組織化学染色(10X)。使用組織:Tris-EDTA buffer(pH 9.0)で熱処理し抗原賦活化したパラフィン包埋ラット脳組織。一次抗体としてTDP-43リコンビナント抗体(カタログ番号:80001-1-RR、希釈倍率1:4000)を使用し、二次抗体としてMulti-rAb Polymer HRP-Goat Anti-Rabbit Recombinant Secondary Antibody(H+L)(カタログ番号:RGAR011)を使用した。
ヒト結腸癌組織スライドの免疫組織化学染色。使用組織:Tris-EDTA buffer(pH 9.0)で熱処理し抗原賦活化したパラフィン包埋ヒト結腸癌組織。一次抗体としてNF-kappa B p65ウサギリコンビナント抗体(他社製品)を使用し、二次抗体としてMulti-rAb Polymer HRP-Goat Anti-Rabbit Recombinant Secondary Antibody(H+L)(カタログ番号:RGAR011)を使用した。
ヒト結腸癌組織スライドの免疫組織化学染色。使用組織:Tris-EDTA buffer(pH 9.0)で熱処理し抗原賦活化したパラフィン包埋ヒト結腸癌組織。一次抗体としてCD31マウスモノクローナル抗体(カタログ番号:66065-2-Ig、希釈倍率1:10000)を使用し、二次抗体としてMulti-rAb Polymer HRP-Goat Anti-Mouse Recombinant Secondary Antibody(H+L)(カタログ番号:RGAM011)を使用した。
ヒト結腸癌組織スライドの免疫組織化学染色(10X)。使用組織:Tris-EDTA buffer(pH 9.0)で熱処理し抗原賦活化したパラフィン包埋ヒト結腸癌組織。一次抗体としてVillin抗体(カタログ番号:66096-1-Ig、希釈倍率1:5000)を使用し、二次抗体としてMulti-rAb Polymer HRP-Goat Anti-Mouse Recombinant Secondary Antibody(H+L)(カタログ番号:RGAM011)を使用した。
マウス小脳組織の免疫蛍光染色。使用組織:FFPE(ホルマリン固定パラフィン包埋)マウス小脳組織。緑:NeuNウサギポリクローナル抗体(カタログ番号:26975-1-AP)/Multi-rAb CoraLite® Plus 488-Goat Anti-Rabbit Recombinant Secondary Antibody(H+L)(カタログ番号:RGAR002、希釈倍率1:500)。オレンジ:Calbindin-D28kマウスモノクローナル抗体(カタログ番号:66394-1-Ig)/Multi-rAb CoraLite® Plus 555-Goat Anti-Mouse Recombinant Secondary Antibody(H+L)(カタログ番号:RGAM003、希釈倍率1:500)。
マウス小脳組織の免疫蛍光染色。使用組織:FFPE(ホルマリン固定パラフィン包埋)マウス小脳組織。緑:NeuNウサギポリクローナル抗体(カタログ番号:26975-1-AP)/Multi-rAb CoraLite® Plus 488-Goat Anti-Rabbit Recombinant Secondary Antibody(H+L)(カタログ番号:RGAR002、希釈倍率1:500)。赤:Calbindin-D28kマウスモノクローナル抗体(カタログ番号:66394-1-Ig)/Multi-rAb CoraLite® Plus 594-Goat Anti-Mouse Recombinant Secondary Antibody(H+L)(カタログ番号:RGAM004、希釈倍率1:500)。
マウス小脳組織の免疫蛍光染色。使用組織:FFPE(ホルマリン固定パラフィン包埋)マウス小脳組織。緑:NeuNウサギポリクローナル抗体(カタログ番号:26975-1-AP)/Multi-rAb CoraLite® Plus 488-Goat Anti-Rabbit Recombinant Secondary Antibody(H+L)(カタログ番号:RGAR002、希釈倍率1:500)。マゼンタ:Calbindin-D28kマウスモノクローナル抗体(カタログ番号:66394-1-Ig)/Multi-rAb CoraLite® Plus 647-Goat Anti-Mouse Recombinant Secondary Antibody(H+L)(カタログ番号:RGAM005、希釈倍率1:500)
マウス小脳組織の免疫蛍光染色。使用組織:FFPE(ホルマリン固定パラフィン包埋)マウス小脳組織。赤:NeuNウサギポリクローナル抗体(カタログ番号:26975-1-AP)/Multi-rAb CoraLite® Plus 594-Goat Anti-Rabbit Recombinant Secondary Antibody(H+L)(カタログ番号:RGAR004、希釈倍率1:500)。緑:Calbindin-D28kマウスモノクローナル抗体(カタログ番号:66394-1-Ig)/Multi-rAb CoraLite® Plus 488-Goat Anti-Mouse Recombinant Secondary Antibody(H+L)(カタログ番号:RGAM002、希釈倍率1:500)。
ラット脳組織の免疫蛍光染色。使用組織:FFPE(ホルマリン固定パラフィン包埋)ラット脳組織。緑:GFAPウサギポリクローナル抗体(カタログ番号:16825-1-AP)/Multi-rAb CoraLite® Plus 488-Goat Anti-Rabbit Recombinant Secondary Antibody(H+L)(カタログ番号:RGAR002、希釈倍率1:500)。オレンジ:NeuNマウスモノクローナル抗体(カタログ番号:66836-1-Ig)/Multi-rAb CoraLite® Plus 555-Goat Anti-Mouse Recombinant Secondary Antibody(H+L)(カタログ番号:RGAM003、希釈倍率1:500)。
ラット脳組織の免疫蛍光染色。使用組織:FFPE(ホルマリン固定パラフィン包埋)ラット脳組織。緑:GFAPウサギポリクローナル抗体(カタログ番号:16825-1-AP)/Multi-rAb CoraLite® Plus 488-Goat Anti-Rabbit Recombinant Secondary Antibody(H+L)(カタログ番号:RGAR002、希釈倍率1:500)。赤:NeuNマウスモノクローナル抗体(カタログ番号:66836-1-Ig)/Multi-rAb CoraLite® Plus 594-Goat Anti-Mouse Recombinant Secondary Antibody(H+L)(カタログ番号:RGAM004、希釈倍率1:500)。
ラット脳切片の免疫蛍光染色。使用組織:FFPE(ホルマリン固定パラフィン包埋)ラット脳切片。赤:GFAPウサギポリクローナル抗体(カタログ番号:16825-1-AP)/Multi-rAb CoraLite® Plus 594-Goat Anti-Rabbit Recombinant Secondary Antibody(H+L)(カタログ番号:RGAR004、希釈倍率1:500)。緑:NeuNマウスモノクローナル抗体(カタログ番号:66836-1-Ig)/Multi-rAb CoraLite® Plus 488-Goat Anti-Mouse Recombinant Secondary Antibody(H+L)(カタログ番号:RGAM002、希釈倍率1:500)。
ラット脳切片の免疫蛍光染色。使用組織:FFPE(ホルマリン固定パラフィン包埋)ラット脳切片。マゼンタ:GFAPウサギポリクローナル抗体(カタログ番号:16825-1-AP)/Multi-rAb CoraLite® Plus 647-Goat Anti-Rabbit Recombinant Secondary Antibody(H+L)(カタログ番号:RGAR005、希釈倍率1:500)。緑:NeuNマウスモノクローナル抗体(カタログ番号:66836-1-Ig)/Multi-rAb CoraLite® Plus 488-Goat Anti-Mouse Recombinant Secondary Antibody(H+L)(カタログ番号:RGAM002、希釈倍率1:500)。
MOLT4のフローサイトメトリー:1X10^6個のMOLT4(Human Leukemia T-Lymphoblast cell line)の細胞表面を染色した。一次抗体:Human CD8抗体(カタログ番号:65204-1-Ig、クローン番号:UCHT4、0.2μg)、Mouse IgG2a isotype control Monoclonal antibody(カタログ番号:66360-2-Ig、0.2 μg)。二次抗体:Multi-rAb CoraLite® Plus 488-Goat Anti-Mouse Recombinant Secondary Antibody(H+L)(カタログ番号:RGAM002)。
MOLT4のフローサイトメトリー:1X10^6個のMOLT4(Human Leukemia T-Lymphoblast cell line)の細胞表面を染色した。一次抗体:Human CD8抗体(カタログ番号:65204-1-Ig、クローン番号:UCHT4、0.2μg)、Mouse IgG2b isotype control Monoclonal antibody(カタログ番号:66360-3-Ig、0.2 μg)。二次抗体:Multi-rAb CoraLite® Plus 555-Goat Anti-Mouse Recombinant Secondary Antibody(H+L)(カタログ番号:RGAM003)。
MOLT4のフローサイトメトリー:1X10^6個のMOLT4(Human Leukemia T-Lymphoblast cell line)の細胞表面を染色した。一次抗体:Human CD8抗体(カタログ番号:65204-1-Ig、クローン番号:UCHT4、0.2μg)、Mouse IgG2a isotype control Monoclonal antibody(カタログ番号:66360-2-Ig、0.2 μg)。二次抗体:Multi-rAb CoraLite® Plus 594-Goat Anti-Mouse Recombinant Secondary Antibody(H+L)(カタログ番号:RGAM004)。
MOLT4のフローサイトメトリー:1X10^6個のMOLT4(Human Leukemia T-Lymphoblast cell line)の細胞表面を染色した。一次抗体:Human CD8抗体(カタログ番号:65204-1-Ig、クローン番号:UCHT4、0.2μg)、Mouse IgG2a isotype control Monoclonal antibody(カタログ番号:66360-2-Ig、0.2 μg)。二次抗体:Multi-rAb CoraLite® Plus 647-Goat Anti-Mouse Recombinant Secondary Antibody(H+L)(カタログ番号:RGAM005)。
MOLT4のフローサイトメトリー:1X10^6個のMOLT4(Human Leukemia T-Lymphoblast cell line)の細胞表面を染色した。一次抗体:HLA class I ABC Polyclonal antibody(カタログ番号:15240-1-AP、0.2 μg)、Rabbit IgG control Polyclonal antibody(カタログ番号:30000-0-AP、0.2 μg)。二次抗体:Multi-rAb CoraLite® Plus 488-Goat Anti-Rabbit Recombinant Secondary Antibody(H+L)(カタログ番号:RGAR002)。
MOLT4のフローサイトメトリー:1X10^6個のMOLT4(Human Leukemia T-Lymphoblast cell line)の細胞表面を染色した。一次抗体:HLA class I ABC Polyclonal antibody(カタログ番号:15240-1-AP、0.2 μg)、Rabbit IgG control Polyclonal antibody(カタログ番号:30000-0-AP、0.2 μg)。二次抗体:Multi-rAb CoraLite® Plus 555-Goat Anti-Rabbit Recombinant Secondary Antibody(H+L)(カタログ番号:RGAR003)。
MOLT4のフローサイトメトリー:1X10^6個のMOLT4(Human Leukemia T-Lymphoblast cell line)の細胞表面を染色した。一次抗体:HLA class I ABC Polyclonal antibody(カタログ番号:15240-1-AP、0.2 μg)、Rabbit IgG control Polyclonal antibody(カタログ番号:30000-0-AP、0.2 μg)。二次抗体:Multi-rAb CoraLite® Plus 594-Goat Anti-Rabbit Recombinant Secondary Antibody(H+L)(カタログ番号:RGAR004)。
MOLT4のフローサイトメトリー:1X10^6個のMOLT4(Human Leukemia T-Lymphoblast cell line)の細胞表面を染色した。一次抗体:HLA class I ABC Polyclonal antibody(カタログ番号:15240-1-AP、0.2 μg)、Rabbit IgG control Polyclonal antibody(カタログ番号:30000-0-AP、0.2 μg)。二次抗体:Multi-rAb CoraLite® Plus 647-Goat Anti-Rabbit Recombinant Secondary Antibody(H+L)(カタログ番号:RGAR005)。
直接ELISA法による抗ウサギ抗体の交差反応性試験:ウサギIgG、マウスIgG、ラットIgG、ブタIgG、ヒトIgG、ウシIgGを総IgG換算で100 ng/wellとなるようにウェルにコーティングした。検出:Multi-rAb HRP-Goat Anti-Rabbit Recombinant Secondary Antibody(H+L)(カタログ番号:RGAR001、0.125μg/mL)。本カクテル化リコンビナント二次抗体(カタログ番号:RGAR001)はウサギIgGに対する特異性が極めて高く、その他の動物種(マウス、ラット、ブタ、ヒト、ウシ)由来IgGとはほとんど反応性を示さなかった。
直接ELISA法による抗マウス抗体の交差反応性試験:マウス総IgG、マウスIgG1、マウスIgG2aマウスIgG2b、マウスIgG3、マウスIgM、マウスIgAのモノクローナル抗体、ラット総IgG、ブタ総IgG、ウサギ総IgG、ヒト総IgG、ウシ総IgGを100 ng/wellとなるようにウェルにコーティングした。検出:Multi-rAb HRP-Goat Anti-Mouse Recombinant Secondary Antibody(H+L)(カタログ番号:RGAM001、0.125μg/mL)。本カクテル化リコンビナント二次抗体(カタログ番号:RGAM001)は、すべてのマウスIgGサブクラス(IgG1/IgG2a/IgG2b/IgG2c/IgG3)、マウスIgM、マウスIgAと強固に結合することが示された。ラットIgGに対しても高い交差性を示した。またブタIgGに対してわずかに反応性を示し、その他の動物種(ウサギ、ヒト、ウシ)由来IgGとはほとんど反応性を示さなかった。
二次抗体の交差反応性は、使用する二次抗体が本来標的としていない免疫グロブリン(Ig)と非特異的に結合することで生じます。組織サンプル中の内在性の免疫グロブリン(Ig)や、マルチプレックス(多重)染色で使用される複数の動物種由来/アイソタイプの一次抗体に対して二次抗体が非特異的に結合した場合、高いバックグラウンドや非特異的シグナルが認められる場合があります。
『Multi-rAb(マルチ・ラブ)』では、ターゲット動物種以外のIgGへの交差反応性が最小限のクローンをスクリーニングし、厳選されたクローンから発現させたリコンビナントモノクローナル抗体を混合しています。以下のデータが示す通り、従来型のポリクローナル二次抗体(交差吸着処理済み/未処理)と同等以上の高い種特異性と低いバックグラウンドを実現します。
Multi-rAb(マルチ・ラブ)製品と競合他社製品(交差吸着処理済み製品/未処理製品)を用いた直接ELISA法によって、各製品のターゲット動物種以外のIgGに対する交差反応性を比較しました。ウサギIgG、マウスIgG、ヒトIgG、ラットIgG、ブタIgG、ウシIgGを総IgG換算で100 ng/wellとなるようにウェルにコーティングしました。検出には、0.125 μg/mLのMulti-rAb HRP-Goat Anti-Rabbit Recombinant Secondary Antibody(H+L)(カタログ番号:RGAR001)、競合他社2社の「交差吸着処理済み二次抗体(cross-adsorbed、highly cross-adsorbed)」および「未処理二次抗体(non-cross-adsorbed)」を使用しました。
『Multi-rAb(マルチ・ラブ)』は、プロテインテックラボによる厳格なスクリーニングおよび特性解析/検証実験を繰り返して厳選された、各クローンに由来する「リコンビナント(組換え)モノクローナル抗体」を混合して製造されます。遺伝子配列を取得して作製されたリコンビナント抗体発現用の各クローンは、同質かつ均一な抗体群を産生するため、高いロット間一貫性と安定的な供給能を提供します。ロット間変動を最小限に抑えられるため、研究結果の再現性が重要となる長期的プロジェクトにおいても有用です。
様々なライセートを用いて実施されたロット間一貫性検証(RGAM001 batch 1~RGAM001 batch 3)。ウェスタンブロット(WB)において、一次抗体としてEIF3Eマウスモノクローナル抗体(カタログ番号:67095-1-Ig、希釈倍率1:50000)を使用し、二次抗体として製造ロット(batch)が異なるMulti-rAb HRP-Goat Anti-Mouse Recombinant Secondary Antibody(H+L)(カタログ番号:RGAM001、希釈倍率1:20000)を用いて化学発光検出しました。
『Multi-rAb(マルチ・ラブ)』シリーズ中の蛍光標識タイプは、厳格なスクリーニングプロセスを通じて選別された候補クローンに対してプロテインテック独自の『CoraLite® Plus(コーラライト)蛍光色素』を標識し、特性評価が実施されています。候補クローンは個別に検証され、最小限の種間交差反応性、低いバックグラウンド、高いシグナルを示す数種類のクローンまで最終的に選抜されました。カクテル化する複数クローンの組み合わせのパターンや配合は、実際のアプリケーションを用いた検証と最適化を繰り返すことによって決定され、最高水準のパフォーマンスを発揮する『新タイプの二次抗体』は完成しました。
CoraLite® Plusシリーズの蛍光色素は、独自の親水性技術である「SuperHydrophilic dPEG®」を利用して開発された、優れた明るさと高い光安定性を示す先進的な蛍光色素です。CoraLite® Plus蛍光色素の詳細についてはこちらをご覧ください。
様々なライセートを用いて実施されたウェスタンブロット検証。一次抗体としてBeta Tubulinリコンビナントウサギモノクローナル抗体(カタログ番号:80713-1-RR、希釈倍率1:20000)を使用し、二次抗体としてMulti-rAb CoraLite® Plus 750-Goat Anti-Rabbit Recombinant Secondary Antibody(H+L)(カタログ番号:RGAR006、希釈倍率1:10000)を用いて化学発光検出しました。
『Multi-rAb(マルチ・ラブ)』は、複数の一次抗体と二次抗体を組み合わせて実施されるマルチプレックス(多重)染色アプリケーションに非常に適しています。Multi-rAbには、厳格なスクリーニングおよび特性解析を通じて選抜された、最小限の種間交差反応性および高い特異性を有するクローン由来のリコンビナントモノクローナル抗体が利用されています。そのためマルチプレックス染色においてターゲットとする一次抗体以外の抗体(IgG)とは結合せず、高いバックグラウンドや擬陽性結果を回避し、特異性の高い染色像を得ることができます。
Multi-rAb(抗ウサギIgG、抗マウスIgG二次抗体)は、以下の一次抗体&二次抗体のペアと組み合わせて、マルチプレックス染色に使用することができます。
- 未標識一次抗体&Multi-rAb二次抗体(抗ウサギIgGまたは抗マウスIgG)
- 未標識一次抗体&従来型ポリクローナル二次抗体
マウス小脳組織を用いて実施された免疫蛍光染色検証。使用組織:FFPE(ホルマリン固定パラフィン包埋)マウス小脳組織。緑:NeuNウサギポリクローナル抗体(カタログ番号:26975-1-AP)/Multi-rAb CoraLite® Plus 488-Goat Anti-Rabbit Recombinant Secondary Antibody(H+L)(カタログ番号:RGAR002、希釈倍率1:500)。オレンジ:Calbindin-D28kマウスモノクローナル抗体(カタログ番号:66394-1-Ig)/Multi-rAb CoraLite® Plus 594-Goat Anti-Mouse Recombinant Secondary Antibody(H+L)(カタログ番号:RGAM004、希釈倍率1:500)。